Ratones transgénicos ApoE en la Diabetes

Tipo de ATs: 
Ratones Knock-out para apoE -/-

Método de obtención:

ADN recombinante mediante la inyección de estreptozotocina en ratones apoE-/-, la administración del péptido derivado de SOCS1 no afectó a la hiperglicemia ni al perfil lipídico de estos animales diabéticos. Sin embargo, mostró un efecto ateroprotector, de manera que la supresión de la activación de STAT1 y STAT3 en la aorta redujo de forma efectiva el tamaño y extensión de las placas de ateroma tanto en fases iniciales como en fases avanzadas del proceso aterosclerótico (1).

Usos:

Simular enfermedades humanas en este caso diabetes, y las afecciones relacionadas a esta como aterosclerosis y nefropatía (1). 

VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS TRANSGÉNICOS

VENTAJAS:

• Posible disminución en los costos de producción.
• Aumento en la calidad de las proteínas, por todas las funciones capaces de realizar los transgénicos a nivel genético.
• Búsqueda de mejores tratamientos, terapias y procedimientos diagnósticos para las enfermedades.
• Son un gran aporte en la producción de fármacos.
• Creación de bancos genéticos para evitar la extinción de las especies.

DESVENTAJAS:

• Dificultad de separar las proteínas humanas de la contraparte animal.
• La expresión de nuevas proteínas puede provocar la aparición de alergias.
• Al modificar especies ya existentes podemos poner en riesgo especies autóctonas.
• Los resultados esperados pueden errar, ya que el lugar donde se coloca el nuevo gen en el genoma puede ser indeterminado.
• Se usan animales vivos, por lo que es primordial hacer un examen ético y determinar cómo de importante pueden ser los resultados del experimento.

REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA:

1.	Recio Cruz, C. Potencial terapéutico de la proteína reguladora SOCS1 en las complicaciones crónicas de la diabetes. [Internet]. 2016 [citado el 25 de julio de 2022]. Disponible en: https://repositorio.uam.es/bitstream/handle/10486/675427/recio_cruz_carlota.pdf?sequence=1

2.	Los animales transgénicos: caracteristicas, usos, ventajas y desventajas [Internet]. agroempresario.com. [citado el 30 de julio de 2022]. Disponible en: https://agroempresario.com/publicacion/9948/los-animales-transgenicos-caracteristicas-usos-ventajas-y-desventajas/

ADN recombinante: Natural y Artificial

ADN recombinante artificial

Tema: Potencial terapéutico de la proteína reguladora SOCS1 en las complicaciones crónicas de la diabetes. 

Objetivo: Prevención, efecto ateroprotector, antiinflamatoria y antioxidante del tratamiento con el péptido derivado de SOCS1.

Gen/secuencia de genes: cDNA de SOCS1

E.R: NdeI y BamHI

E.L: E3 obiquitin ligasa.

V: p513HA

C.R: Células empaquetadoras HEK 293 (eucariota)

MIG: Transfección

MIC: Cultivo celular, PCR en tiempo real (gen), modelo experimental: ratón vía intraperitoneal, Western Blot (proteínas), Inmunocitofluorescencia, citometría de flujo (células), ELISA, Inmunohistoquímica y análisis bioquímicos: lípidos, glucosa, hemoglobina glicosilada, albúmina y creatinina.

ADN recombinante natural 

Tema: Efecto de la recombinación de segmentos genómicos de betanodavirus en la adaptación del virus a su huésped. Objetivo: Analizar los factores implicados en la patogénesis de cepas recombinantes de betanodavirus en lenguado y rodaballo. Discusión: El lenguado es muy susceptible a estos virus y que en comparación con cepas de genotipo parental (RGNNV y SJNNV), la cepa recombinante (RGNNV/SJNNV) Ss160.03 es la cepa más eficaz infectando esta especie ya que llega al cerebro con celeridad, alcanzando unos altos niveles de replicación, y es la que causa signos clínicos más acusados y mortalidad más rápidamente tras una infección por inmersión, la ruta más parecida a la infección natural (2).

                               

REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA:

1.	Recio Cruz, C. Potencial terapéutico de la proteína reguladora SOCS1 en las complicaciones crónicas de la diabetes. [Internet]. 2016 [citado el 25 de julio de 2022]. Disponible en: https://repositorio.uam.es/bitstream/handle/10486/675427/recio_cruz_carlota.pdf?sequence=1

2.	Pereira SS. Efecto de la recombinación de segmentos genómicos de betanodavirus en la adaptación del virus a su huésped. AquaT (Zaragoza) [Internet]. 2017 [citado el 25 de julio de 2022];0(45):32–3. Disponible en: http://revistaaquatic.com/ojs/index.php/aquatic/article/view/301

Prueba de Microarray en la Diabetes Mellitus (DM)

La identificación de DM como una manifestación temprana del cáncer de páncreas puede conducir a la detección temprana y presintomática de esta malignidad. Utilizando el análisis GEO2R, ​​realizado en un conjunto de datos Microarray (GSE15932), se encontraron los genes SPI1 y Yin Yang 1 (YY1) en células mononucleares de sangre periférica. Además, los resultados de qRT-PCR que validaron los datos de microarrays mostraron un aumento significativo en estos dos genes en todos los grupos de pacientes con cáncer de páncreas y DM; y también los análisis de enriquecimiento de los genes diana SPI1 e YY1 revelaron que se expresan principalmente en células hematopoyéticas y se asocian con respuestas y vías de señalización inmunitarias. 

REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA:

1.

Kazemi B, Kalantari S, Pourshams A, Roudi R, Zali H, Bandehpour M, et al. Identification of potential common molecular factors of pancreatic cancer and diabetes mellitus using microarray data analysis combined with bioinformatics techniques and experimental validation. Biomed Biotechnol Res J (BBRJ) [Internet]. 2021 [citado el 12 de julio de 2022];5(3):294. Disponible en: https://www.bmbtrj.org/article.asp?issn=2588-9834;year=2021;volume=5;issue=3;spage=286;epage=294;aulast=Kalantari

La PCR como prueba para confirmar casos vigentes de COVID-19

La detección de la infección por SARS-CoV-2 mediante PCR implica el uso de una variante de esta tecnología conocida como RT-PCR. En tiempo real, muestra el nivel de fluorescencia y puede confirmar, con un 90% de confiabilidad vírica el estado actual de infección en el paciente. El proceso comienza una vez que se recoge el material genético viral a partir de una muestra de hisopo de la nariz o garganta, para luego continuar con la separación y purificación del ARN vírico antes de iniciar la amplificación; posteriormente se realiza la transcripción  inversa, sintetizando ADN complementario a partir de ARN viral gracias a la enzima transcriptasa inversa; para luego mediante la utilización de oligonucleótidos específicos que actuarán como cebadores de la acción de la polimerasa, se amplifique el cDNA de genes específicos como: RBD, Spike, N.
Obteniendo así la emisión de fluorescencia por la adición de sondas a la muestra y la computadora por su parte, presentará los resultados en tiempo real, de modo que al superar un determinado nivel se confirma la presencia del virus.  

REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA: 

1.	Carranza LAS, Santacruz FEM, Villegas JAC. La PCR como prueba para confirmar casos vigentes de COVID-19. Recimundo.com. [Internet]. 2020 [citado el 4 de julio de 2022];4(2):64–74. Disponible en: http://recimundo.com/index.php/es/article/view/824